EM Cryo CLEM是我们低温工作流程中的一个关键元素。我不想错过它。

Yannick Schwab博士,德国海德堡EMBL电子显微镜核心设施组长和负责人

我们决定继续使用THUNDER Imager EM Cryo CLEM系统,因为其出色的图像质量和成像过程中保持样品安全的能力。

Dorit Hanein教授,结构生物与化学系,细胞大分子机器结构研究实验室,法国巴黎巴斯德研究所

没有雷成像仪的海拉细胞
海拉细胞与雷声成像仪

用THUNDER更清楚地识别和描绘您感兴趣的区域

为了实现细胞结构的最佳可视化,雷成像仪EM低温CLEM结合了高分辨率低温物镜和来自徕卡微系统的雷技术。万博体育结果是清晰、无雾的图像。

app1manbetxnet 采用创新的徕卡计算清除方法,以消除可发生在大视场观测失焦模糊。THUNDER Imager EM Cryo CLEM还包括一个50x / 0.9 NA物镜。与通常使用的长工作距离物镜相比,这种透镜被专门设计用于玻璃化样品的高分辨率成像。您受益于更好的识别和可视化细胞结构的细微细节,以及广角显微镜的速度和易用性。

互动图片:海拉细胞镀在黄金Quantifoil r2 /2涂层G200F1 finder网格。
细胞转染GFP-TGN46(反式高尔基网络)和mCherry-Lifeact (F-actin)。核用Hoechst 33342染色。样品由Lucy Collinson提供,弗朗西斯克里克研究所,伦敦(英国)。

简单的、可再生的工作流

如果您需要在电子显微镜中快速找到您感兴趣的区域,那么您可以轻松地选择标记它并在标本转移过程中导出坐标。直观的软件指导您完成工作流程,因此您可以快速有效地获得所需的结果,以支持成功的电磁调查。为了获得高分辨率、无模糊的结果,请稍后使用THUNDER处理您的图像。

受益于:

  • 容易,精确的目标和数据捕获-软件指导您一步一步通过成像工作流程
  • 无麻烦的成像-简单地标记你感兴趣的区域和软件自动捕获和精确缝合在一起的马赛克图像
  • 使用THUNDER进行高分辨率、无模糊图像的后期处理
  • 快速,可复制的结果-你可以保存和回忆完整的实验设置
雷电成像仪EM低温CLEM
用emcryo CLEM在EM网格上可视化和选择性标记细胞的荧光图像。
同样的细胞用坐标标记显示出来,在这里,在Thermo Scientific Aquilos上。

利用低温光显微镜易于检索与坐标转移

THUNDER Imager EM Cryo CLEM的集成软件不仅可以指导您完成成像工作流程,还可以通过单击一键导出原始图像数据和相关坐标。您可以立即在首选的电子显微镜中重新定位细胞靶区,并开始对标本的超微结构进行研究。

如果您选择与赛默飞世尔科学MAPS EM合作,您还可以从我们共同开发的低温电子断层摄影工作流程.该工作流程确保了从我们的EM GP2玻璃化到使用Thermo Scientific Krios™G3i低温TEM的3D图像重建的完全集成。

互动图片:坐标的选择和检索。细胞在EM网格上的荧光图像的可视化和选择性标记。完全相同的细胞通过坐标标记重新定位,在这里,在Thermo Scientific Aquilos上。

低温条件下保持

为了最大限度地提高成功实验结果的概率,独特的墨盒系统和封闭的低温stage确保您的标本保持玻璃化。该系统最大限度地减少了在加载和传输过程中,甚至在长期图像记录过程中的潜在污染。

它是如何工作的

枪管系统(1)允许安全和快速处理标本。压夹机构加速了样品的吞吐量和网格进入低温阶段的加载时间。

航天飞机对接站(2)通过保持最佳温度来保护你的低温样品。

带有同步物镜盖的低温级(3)通过保持样品处于稳定的超压下,防止其受到空气污染

使用传送梭将网格弹装入THUNDER Imager EM Cryo CLEM

使用THUNDER Imager EM Cryo CLEM优化您的工作流程

通过集成THUNDER Imager EM cryo CLEM,增强您的低温CLEM和网格上的低温薄片工作流程。

为了使您的样品制备过程更加可靠和高效,我们与我们的合作伙伴Alvéole和赛默飞世尔科学建立了合作关系。

数据由B. Engel博士提供,分子结构生物学系,马克斯普朗克生物化学研究所,Martinsried,德国。Albert S, Schaffer M, Beck F, Mosalaganti S, Asano S, Thomas HF, Plitzko JM, Beck M, Baumeister W, Engel BD.蛋白酶体系于核孔复合体的两个不同位置。

冷冻电子断层扫描图的分割,显示细胞核周围的原生细胞环境。蛋白酶体与核孔复合体(紫色)在两个不同的位置(橙色:膜系着的蛋白酶体,黄色:篮系着的蛋白酶体,蓝色:游离蛋白酶体)相连。核膜(灰色),核糖体(黑色/白色)和线粒体(红色,带有一排排黄色ATP合酶)也显示出来。

细胞定位PRIMO由Alvéole

使用PRIMO(来自Alvéole的无掩模微图系统)控制细胞粘附位置和EM网格上的扩展形状。放心,您将获得一个位置良好的细胞,包含您正在寻找的目标结构。首先可以添加到所有低温CLEM工作流作为第一步。

与赛默费雪科学完全集成的低温电子断层摄影工作流程

我们与赛默飞世尔科学公司密切合作,开发了一个完全集成的低温电子断层摄影工作流程。THUNDER Imager EM Cryo CLEM和Aquilos Cryo FIB-SEM之间可以无缝通信。它们能够快速检索目标结构,并在系统之间进行安全可靠的样本传输。

了解更多有关整合PRIMO和我们与赛默飞世尔科学共同开发的工作流程在这里。

点击下面的工作流解决方案,了解如何实现高质量的结果。有关生命科学研究工作流解决方案的更多信息,下载我们的工作流程小册子

(1)无微图的EM网格|(2)用PRIMO控制细胞粘附|(3)玻璃化|(4)选择|(5)磨粒| (6)3D低温层析|(7)细胞环境中的蛋白质

低温CLEM工作流

如果您想准备组织样本,添加THUNDER Imager EM Cryo CLEM作为您的Cryo CLEM工作流程中的中间步骤。

它使您能够轻松地识别感兴趣的区域,并在样品中的特定位置制备片层。

(1)用PRIMO定位细胞|(2)高压冷冻(EM ICE) |(3)低温切片(EM UC7 /EM FC7) |(4)识别感兴趣区域(THUNDER Imager EM Cryo CLEM) | (5) TEM成像

低温网格薄片工作流程(a)

为了从分析蛋白质结构的原始环境中获得可靠的结果,使用Thermo Fisher公司的冷冻fib扫描电镜完全集成的工作流程。

选择最合适的细胞,用THUNDER Imager EM Cryo CLEM进行分析,并将坐标转移到Thermo Scientific Aquilos,在那里您可以立即检索它们。Aquilos克服了厚度的限制,形成了薄冰层,然后可以在TEM中进行检测。

使用Thermo Fisher Aquilos低温fib扫描电镜。(1)使用PRIMO |进行细胞定位(2)插入冷冻(EM GP2) |(3)识别感兴趣区域(THUNDER Imager EM Cryo CLEM) |(4)使用Thermo Fisher Aquilos低温FIB SEM进行磨粒和涂膜|(5)在TEM中成像

低温网格薄片工作流程(b)

THUNDER Imager EM Cryo CLEM可以集成在每一个FIB-SEM工作流程中。

我们的产品可以无缝连接,以确保安全的样品传递贯穿整个过程。

除热飞雪Aquilos低温fib SEM外,所有FIB-SEM供应商均可使用。(1)用PRIMO定位细胞|(2)插入冷冻(EM GP2) |(3)识别感兴趣区域(THUNDER Imager EM Cryo CLEM) |(4)转移(EM VCM) |(5)涂膜(EM ACE600/EM ACE900) |(6)转移(EM VCT500) | (7) FIB铣刀| (8)TEM成像

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和我们的专家谈谈。我们很高兴回答您的所有问题和关切。

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